Q：電泳條帶模糊?
A：
? 電泳緩沖液緩沖能力差。 電泳緩沖液多次使用后，離子強(qiáng)度降低，pH值上升，緩沖性能下降，可使DNA電泳產(chǎn)生條帶模糊和不規(guī)則的DNA條帶遷移的現(xiàn)象。
? 電壓過高，電泳時(shí)間過長(zhǎng)。電泳時(shí)電壓不應(yīng)該超過20 V/cm，電泳溫度應(yīng)該低于30℃。如果電泳時(shí)電壓和溫度過高，可能導(dǎo)致出現(xiàn)條帶模糊和不規(guī)則的DNA條帶遷移的現(xiàn)象。特別是電壓太高易出現(xiàn)缺帶現(xiàn)象。電泳過程中由于會(huì)產(chǎn)熱，因此電泳時(shí)間長(zhǎng)容易發(fā)生條帶模糊，特別是小片段會(huì)變得模糊。
? 凝膠放置時(shí)間太長(zhǎng)或瓊脂糖的質(zhì)量差，導(dǎo)致DNA 條帶分辨率降低。
Q：DNA Marker 降解?
A：污染了核酸外切酶。建議用滅菌的槍頭，用后及時(shí)將管蓋擰緊。點(diǎn)樣時(shí)勿將電泳緩沖液帶入管中，建議更換槍頭。
Q：用EB瓊脂糖膠電泳不同時(shí)間會(huì)出現(xiàn)條帶亮度變化?
A：由于電泳過程中條帶與EB泳動(dòng)方向相反，結(jié)合EB的量會(huì)隨時(shí)間變化，因此電泳后條帶亮度會(huì)發(fā)生變化。因此建議使用EB染膠實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定量。
Q：DNA Marker電泳條帶分離效果不好?
A：瓊脂糖制膠濃度不合適，導(dǎo)致分辨率降低。制膠不均勻有時(shí)也會(huì)導(dǎo)致電泳異常。建議使用新制備的凝膠，制膠時(shí)注意操作中帶來的濃度誤差。一般對(duì)于大分子量片段，低濃度膠分離效果好；對(duì)于小分子量片段，高濃度膠分離效果好。
Q：不同核酸染料對(duì)DNA Marker 遷移率的影響?
A：預(yù)加GeneFinder、GelStain、GoldView到DNA Marker中，對(duì)Marker的遷移率都有一定的影響。
